Fue una de los hijos de Giovanni Battista della Tolfa, II señor de Serino y de Francesca Carafa. Su familia paterna forma parte de la nobleza romana y por parte de su madre pertenecía a una de las familias más importantes del reino de Nápoles. Algunos miembros de su familia paterna habían ayudado a la naciente Compañía de Jesús a asentarse en Roma. Su pariente Antonio, cedió a Ignacio de Loyola una casa en Roma para que les sirviera de residencia entre 1538 y 1541. Asimismo, su tía paterna Vittoria Frangipani della Tolfa cedió a los jesuitas la iglesia de la Anunciación para que sirviera de núcleo al Colegio Romano.

Contrajo matrimonio con el noble napolitano de origen español, Giovanni di Guevara, I duque de Bovino. Isabella y Giovanni tuvieron varios hijos, entre ellos:

• Beatrice, casada con Tommaso III Filomarino, principe della Roca.

• Innico, que le sucedería como duque de Bovino y gran senescal del reino de Nápoles. Contrajo dos matrimonios, con descendencia y después entró en la Compañía de Jesús.
• Antonio^[1]​
• Francesco^[1]​

1. ↑ ^{a b} «I Guevara di Malta». Nobili Napoletani. Consultado el 23 de agosto de 2025.