Llegó a Roma hacia 1544. Desde 1547 fue clérigo beneficiado de la Basílica de San Pedro del Vaticano.

En 1558 comenzó su actividad como historiador de esta basílica por encargo de su protector Giacomo Ercolano, canónigo del templo.^[1]​ Realizó su trabajo a partir del ya realizado por Pietro Mallio en su obra Descriptio Basilicae Vaticanae (siglo XII).^[2]​

Hacia 1582 había compilado la que sería su principal obra De basilicae vaticanae antiquissima et nova structura. En esta obra se incluyen tanto amplías descripciones de la antigua basílica de San Pedro del Vaticano, que estaba siendo demolida para construir una nueva edificación; como tres planos detallados de la basílica correspondientes a 1571, 1576 y 1588 (publicada en 1590).^[3]​^[4]​

También en 1582 se trasladó a Perugia para seguir estudios universitarios. Cuatro años después se graduó in utroque jure.

Tras su muerte, legó sus obras y papeles al capítulo de la Basílica de San Pedro. En 1914 se publicó su obra sobre la antigua basílica de San Pedro, a cargo del doctor Michele Ceratti. Esta obra es de gran importancia documental y contiene una amplia descripción de la antigua basílica de San Pedro.

Entre sus obras se encuentran los siguientes:

• Cerrati, Michele, ed. (1914). De basilicae vaticanae antiquissima et nova structura (en latín). Roma: Tipografia poliglotta vaticana. 

• Cerratti, Michele (1914). «Introduzione. I. Tiberio Alfarano». En Cerrati, Michele, ed. De basilicae vaticanae antiquissima et nova structura (en italiano). Roma: Tipografia poliglotta vaticana. pp. XI-XIV. 
• Hermanin de Reichenfeld, Biancamaria (23 de abril de 2020). «2. Tiberio Alfarano e la Basilica Vaticana». Tiberio Alfarano e la Basilica Vaticana (Tesis de doctorado) (en italiano). Roma: Universidad de Roma III. 
• Ruysschaert, José (1960). «Alfarano, Tiberio». Dizionario biografico degli italiani 2.