• Los sextillizos (Matsuno): Son seis hermanos idénticos, Osomatsu, Karamatsu, Choromatsu, Ichimatsu, Jyushimatsu y Todomatsu, son los personajes principales

• Koneho (Iyami): Koneho procede de Francia, un personaje pérfido y retorcido, es muy pobre y quiere hacerse rico pasándose por estar muerto, robar a la gente y luego venderlo, etc. Es el primo de Chibita y el enemigo de los hermanos Matsuno. Cuando va a algún restaurante se va sin pagar. Tiene un grito característico, Shi!

• Tetoko Metoko (Totoko): Una niña tan dulce como engreída y superficial. Casi todos están enamorados de ella, Koneho, Chibita, Hatabo, etc. Además, es la única niña que sale en la serie. Le gusta que la elogien y le digan lo bonita que es. Solo le importa ser el centro de atención

• Chibita: Es el pequeño de todos de la serie y el más sensible. Elabora planes malvados para Osomatsu y sus hermanos junto a Koneho.

• Matsuzo

• Matsuyo

• Hatabo Metenabo (Hatabo Dajoo): Es un niño a la altura de Chibita. Es muy amigo de Chibita. Está enamorado de Totoko.

• Dekapan: Es el inventor de la serie. Y también sale en algunos capítulos haciéndose pasar por otras personas, por ejemplo, Dios, el tío de los Hermanos Matsuno, etc.

• Dayon: (su nombre viene de la palabra japonesa "Dayo" que significa "así", pero terminada en "n" nasal, es algo parecido a que nosotros dijésemos "asín")

• Abuelo (Noojisan)

• Chikako

• Señor Honkan, policía. Le gusta disparar a lo loco sin parar.

• El perro nocturno

• Jajako

• Kemunpasu

• Beshi

• El abuelo de Rerere

• Nyarome

• Zukiko: Es la chica más popular del barrio después de Totoko.

• Papá Tontobón: Es el padre de Tontobón y Hajime. Siempre dice: ¡Esto es lo que hay!

• Tontobón: Es el hijo de papá Tontobón y mamá Tontobón y hermano mayor de Hajime. Es igual de tonto que su padre. Se lleva bien con él pero a veces se pelean por cosas sin importancia.

• Hajime: Es el hermano menor de Tontobón. Es dulce y un auténtico genio.

• Mamá Tontobón: Es una madre dulce y comprensiva. Se lleva muy bien con todos. Pero no le gustan a veces las bromas de su hijo.

• Can-guila: Es el que narra la historia.

Su doblaje fue realizado por la empresa Dubbing Films S.L en Barcelona.^[1]​ En Valencia hicieron su propio doblaje para el canal Nou 2, al igual que en Galicia que hicieron su propio doblaje para el programa Xabarín Club y en País Vasco que también hicieron su propio doblaje y lo emitieron en ETB 1.

• Artículo principal: Anexo:Episodios de Osomatsu-kun

• Opening 1966 「Bokura wa Muttsuko」(Somos los sextillizos)
• Opening 1988 「正調おそまつ節」 "seichou osomatsu bushi" (Párrafo de Osomatsu, la melodía ortodoxa)
• Ending 「Osomatsu Ondo」(El baile de Osomatsu)

• Opening Osomatsu 1966
• Opening Osomatsu 1988