Margalida Castro creció en la ciudad de Bogotá. Procedente de una familia santandereana, su padre fue un reconocido abogado y su madre fue una institutriz. Estudió en el Colegio Departamental de la Merced en donde profundizó sus conocimientos en música.^[4]​

Entró en la Universidad Nacional de Colombia para estudiar arquitectura; también estudió flauta y fue parte de la orquesta de la universidad. No pensó en ser actriz, hasta que fue llamada a interpretar la flauta en una obra de teatro infantil. En aquella obra ya participaban futuros actores y directores como Pepe Sánchez (director), Vicky Hernández y Álvaro Ruiz Zúñiga. En estas obras de teatro conocería a quien sería su futuro esposo, el dramaturgo Carlos Perozzo. A partir de este momento Margalida Castro dejaría sus estudios para dedicarse tiempo completo a su carrera en la actuación.^[5]​

Fue becada por el gobierno francés para estudiar arte dramático. Su debut en la televisión colombiana fue en 1967, en la serie La tercera palabra, dirigida por Bernardo Romero Lozano. Desde entonces apareció en decenas de obras de teatro, telenovelas colombianas y películas.^[2]​

En 1986 mereció el Premio India Catalina por su interpretación como Sussy Borda de Lavalle, la mamá de ‘Mencha’ interpretada por Margarita Rosa de Francisco, en la telenovela Gallito Ramírez.^[2]​

Para la telenovela colombiana Yo amo a Paquita Gallego de 1998, el escritor y guionista Julio Jiménez creó un papel especial para la actriz Margalida Castro. La interpretación de Isabel ‘Chavela’ Vargas (la tía de Paquita), le permitió alzar el premio a mejor actriz de reparto de telenovela en los Premios TVyNovelas (Colombia) de 1999.^[6]​

Margalida Castro actuó en Rauzán, una telenovela de R.T.I. y Caracol Televisión realizada en 2000. En esta producción Margalida interpretó el papel de Heraclia de Santiño: la tía de la protagonista Soledad de Santiño.^[7]​ Heraclia tiene el papel de malvada y tendrá el objetivo de desaparecer el bebé de Soledad. Esta novela fue vista en más de cien países a pesar de que en Colombia no tuviera el mismo éxito.^[2]​

Margalida Castro también hizo parte de la telenovela colombiana Retratos. Esta novela fue producida por Fox Telecolombia para RCN Televisión en 2003. En esta producción desempeñó el papel de Martirio.^[8]​

En 2004, Margalida Castro volvió a interpretar un papel diferente a los que venía desempeñando. En este año interpretó un papel de carácter como fue el de Inés de Montes, la suegra en la serie colombiana La viuda de la mafia.^[9]​

Margalida Castro volvió a consagrarse en 2012 con la estatuilla de mejor actriz de reparto de telenovela en los Premios India Catalina. Este reconocimiento le fue entregado por su interpretación como Gertrudis ‘Dudis’ Buenahora en la telenovela El secretario producida y transmitida por el Canal Caracol. Además, los Premios TVyNovelas (Colombia) también la consagraron como actriz de reparto favorita de telenovela gracias a este papel actoral.^[10]​

En 2013 los Premios India Catalina rindieron homenaje a la actriz Margalida Castro haciéndole entrega del reconocimiento Premio Víctor Nieto a toda una vida. Este premio le fue entregado por Salvo Basile presidente de la junta directiva del FICCI. Este es un galardón que se entrega a quienes han marcado hito en la historia de la televisión colombiana.^[11]​

Margalida falleció el 19 de diciembre de 2024 a causa de un agresivo cáncer. La noticia la dio a conocer Claudia Serrato, su mánager, a través de su cuenta oficial de Instagram.

“Con profunda tristeza en el alma les comunico que mi grandiosa actriz y amiga Margalida Castro falleció, víctima de un cáncer que fue descubierto hace muy poco”,^[12]​ escribió.

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Su trabajo literario es de carácter testimonial.

• Margálida Castro en Internet Movie Database (en inglés).