La historia se desarrolla en un Edo alternativo, alrededor de 100 años en el pasado, donde insectos gigantes conocidos como "Mushi" atacan a la población. Para contrarrestar esta amenaza, el shogunato establece la Magistratura Mushi (Mushibugyō), una unidad especial compuesta por guerreros con habilidades excepcionales para combatir a estos insectos. El protagonista, Jinbei Tsukishima, es un joven y entusiasta samurái que se une a la Magistratura para reemplazar a su padre, buscando restaurar el honor de su familia.

• Jinbei Tsukishima (月島 仁兵衛, Tsukishima Jinbei):

Voz por: KENN

El personaje principal y el miembro más reciente del Mushibugyō. A pesar de ser inexperto, su determinación y espíritu inquebrantable lo ayudan a ganarse el respeto de sus compañeros. Es hijo de un samurái que se vio obligado a sacrificarse, y Jinbei busca redimir el honor familiar.

• Mugai (無涯):

Voz por: Takuma Terashima

El guerrero más poderoso del Mushibugyō. Es un espadachín excepcional con una fuerza sobrehumana. Antiguo líder de los Mushikari (Cazainsectos), se une al Mushibugyō por razones desconocidas.

• Hibachi (火鉢):

Voz por: Rumi Ōkubo

Una ninja especializada en explosivos. Busca demostrar su valía como sucesora de las técnicas de su abuelo. Inicialmente admira a Mugai, pero desarrolla sentimientos por Jinbei.

• Shungiku Koikawa (恋川 春菊, Koikawa Shungiku):

Voz por: Takuya Eguchi

Conocido como el "Asesino 99", se une al Mushibugyō en busca de redención. Tras vengar la muerte de su madre, cambia su título a "Asesino 100".

• Tenma Ichinotani (一乃谷 天間, Ichinotani Tenma):

Voz por: Yū Serizawa

El miembro más joven, un onmyōji capaz de invocar poderosas criaturas para el combate.

• Kotori Matsunohara (松ノ原 小鳥, Matsunohara Kotori):

Voz por: Mamoru Miyano

El enigmático comandante del Mushibugyō. Sus habilidades y conocimientos son un misterio.

• Kuroageha (黒揚羽):

Voz por: Megumi Han

La Magistrada del Mushibugyō, también conocida como la "Mariposa Negra". Su cuerpo produce un veneno letal, y su poder se manifiesta en forma de alas de mariposa oscuras.

• Haru (春):

Voz por: Satomi Akesaka

Una joven dueña de un restaurante que se convierte en la primera amiga de Jinbei en Edo y desarrolla sentimientos por él.

• Nagatomimaru (長福丸):

Voz por: Jun Fukuyama

Un erudito enmascarado, amigo de Jinbei. En secreto, es el hijo del Shogun y heredero al trono.