Hijo de Mateo Estuardo, II conde de Lennox, y Elizabeth Hamilton, hija de James Hamilton, I señor Hamilton, y María Estuardo, condesa de Arran, hija de Jacobo II de Escocia.

El conde de Lennox dirigió un ejército a Linlithgow con la intención de liberar al joven rey Jacobo V del Clan Douglas, partidarios de los ingleses. Fue derrotado por una pequeña fuerza encabezada por el conde de Arran en la batalla de Linlithgow Bridge. Sobrevivió, pero fue tomado prisionero y asesinado por James Hamilton de Finnart. Sería sucedido por su hijo, Mateo Estuardo, IV conde de Lennox, padre de Enrique Estuardo, Lord Darnley, y abuelo de Jacobo VI de Escocia y I de Inglaterra.

El 19 de junio de 1511, se casó con lady Isabel Estuardo, hija de Juan Estuardo, I conde de Atholl, y de Eleanor Sinclair, hija de William Sinclair, III conde de Orkney. Tuvieron cinco hijos:

• Mateo Estuardo, IV conde de Lennox.
• Roberto Estuardo, I conde de la Marca.
• Juan Estuardo, V señor de Aubigny, padre de Esmé Estuardo, I duque de Lennox.
• Helen Estuardo, casada con John Gordon, XI conde de Sutherland.
• Elizabeth Estuardo, casada con William, conde de Erroll y amante de Jacobo V de Escocia.

• Esta obra contiene una traducción derivada de «John Stewart, 3rd Earl of Lennox» de Wikipedia en inglés, publicada por sus editores bajo la Licencia de documentación libre de GNU y la Licencia Creative Commons Atribución-CompartirIgual 4.0 Internacional.